药学毕业论文范文

01
  牛白藤的生药学研究
  【摘要】 目的 对茜草科植物牛白藤进行生药学研究。方法 采用性状鉴定、显微特征与薄层鉴别的方法。结果 显微鉴定中的晶鞘纤维具有一定的鉴别意义;薄层鉴别检出熊果酸、 β谷甾醇和东莨菪素等成分。结论 所得结果为提高该药材质量标准,开发和利用该药材资源提供依据。
  【关键词】 牛白藤;生药学研究;显微特征;薄层鉴别
  牛白藤为茜草科植物牛白藤Oldenlandia hedyotidea (DC.) HandMazz.的干燥藤茎,别名土加藤。牛白藤生于山谷、坡地、林下、灌木丛中,分布于广东、广西、云南、福建、台湾等地,越南亦有分布。味微甘,性凉,具有清热解暑、祛风活络、消肿止痛的功效,主治感冒发热、风湿痹痛、跌打损伤[1]。
  牛白藤作为地方习用药材,收载于《广东省药材标准》,但其质量标准尚不完善,为了更好地保证其药材的安全、有效、质量均衡,本文对其进行药材性状、组织显微及理化鉴别研究,完善其质量标准,为其开发利用奠定基础。
  1、材料与仪器
  1.1 材料
  实验药材和对照药材分别采自广州大学城和鼎湖山自然保护区,均经作者鉴定为牛白藤Oldenlandia hedyotidea (DC.) HandMazz.;熊果酸、β谷甾醇、东莨菪素对照品均购自中国药品生物制品研究所;乙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、正己烷均为分析纯。
  1.2 仪器
  SK250LH超声波清洁器(上海科导超声仪器有限公司);WD9403C紫外分析仪(北京市六一仪器厂);YOKOPN电动喷雾器(武汉药科新科技开发有限公司);Nikon YS100生物显微镜(日本尼康公司);封闭式电子可调电炉(广州伟业五金器械厂)。
  2、药材鉴定
  藤茎类圆形,直径0.2~1.2 cm。表面粗糙,灰白色或灰黄色,有突起较细的纵直筋脉纹,老茎可见灰白色纵长突起相互连接的皮孔斑,刮去表层栓皮现灰绿色。质坚硬,不易折断,断面皮部浅灰褐色,木部占大部分,黄白色或淡黄色,髓多中空。无臭,味微甘。
  3、显微特征
  3.1 茎横切面
  表皮尚存,为1层扁平、无细胞间隙的细胞组成,开裂状。非腺毛多见,且多为红色。木栓层为6~9列木栓细胞,细胞呈扁平状,砖形,排列整齐、紧密,往往多层相迭。木栓形成层为1层扁平的长方形细胞。栓内层为1~2层薄壁细胞,切向延长。皮层细胞含有草酸钙簇晶,尚含有石细胞。内皮层细胞排列紧密整齐。维管束外韧型。韧皮部窄,木质部较宽,导管孔径较大;木质部射线1-2列;导管单列或2、3个并列。髓部类方形或类圆形,薄壁细胞内含针晶。草酸钙针晶束几充满细胞腔。
  3.2 粉末
  粉末灰白色。木栓细胞表面观多角形。草酸钙针晶束暗灰色,针晶长约80 μm;草酸钙簇晶直径7~20 μm。导管主要为具缘纹孔导管,直径30~80 μm;螺纹导管多见,直径约11~20 μm。纤维管胞多见,具缘纹孔口V形、X形或斜裂状。非腺毛单细胞和多细胞,有长和短两种[2]。石细胞众多,单个或多个相聚,形状各异,孔沟或层纹明显,壁较厚,胞腔狭窄。晶鞘纤维多见,薄壁细胞内含草酸钙簇晶。淀粉粒较多,单粒类圆形,脐点明显,层纹不明显,复粒由2~4个分粒组成。
  4、薄层色谱鉴别[3]
  4.1 牛白藤薄层鉴别Ⅰ
  取本品粉末1 g,加乙醇10 mL,超声处理15 min,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取牛白藤对照药材1 g,同法制成对照药材溶液。再取熊果酸对照品、β谷甾醇对照品,各加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照《中国药典》(2005版一部附录VI B)薄层色谱法试验,吸取上述4种溶液各2 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷乙酸乙酯甲酸(体积比20∶4∶0.5)为展开剂,展开缸饱和15 min,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇液,在105 ℃加热至斑点显色清晰,分别置日光及紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,日光下与紫外光灯(365 nm)下都分别显相同颜色的斑点。
  5、讨论
  5.1 首次发现牛白藤的粉末特征中含有晶鞘纤维,数量不少,可作为其显微鉴定特征之一。在实验过程中发现牛白藤存在较多的螺纹导管,与文献[1]报道的“螺纹导管较少见”不一致,原因有待进一步探讨。
  5.2 牛白藤含有熊果酸、β谷甾醇及东莨菪素等成分[4],选择它们作为薄层鉴别的对照品,分别选择正己烷乙酸乙酯甲酸(体积比20∶4∶0.5)和环己烷三氯甲烷乙酸乙酯甲酸(体积比6∶10∶7∶1.2)作为展开剂,分离效果好,斑点匀称,可作为牛白藤的鉴别依据。
  【参考文献】
  [1] 广东省食品药品监督管理局.广东省中药材标准:第一册[M].广东:广东科技出版社,2002: 42.
  [2] 黄成勇,廖月葵,林安平.牛白藤的生药鉴定[J].中草药,2001,32(6):54.
  [3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版一部[S].北京:化学工业出版社,2005:23.
  [4] 彭江南,冯孝章,梁晓天.耳草属植物化学成分的研究IV:牛白藤化学成分的研究[J].中草药,1997,28:45-46.

药学大专毕业论文

02
  清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别
  【摘要】 目的 建立清喉消炎颗粒的薄层色谱鉴别方法。方法 采用薄层色谱法对清喉消炎颗粒中的板蓝根、地胆草、甘草等药材进行了鉴别。结果 薄层色谱法能清晰地鉴别清喉消炎颗粒中的板蓝根、地胆草、甘草,阴性无干扰。结论 建立的薄层色谱法操作简单,斑点清晰,分离度好,重现性好,可作为清喉消炎颗粒的质量控制方法。
  【关键词】 清喉消炎颗粒;薄层色谱;板蓝根;地胆草;甘草
  清喉消炎颗粒是由板蓝根、地胆草、甘草等中药组成。该制剂是按医院协定的处方改革而得到的新剂型,具有清热解毒、凉血利咽的功效。可用于咽喉肿痛等症状。本文对清喉消炎颗粒处方中的板蓝根、地胆草、甘草等中药进行了薄层鉴别,从而为其质量控制提供必要的依据。
  1、仪器与试药
  1.1 仪器
  ZF90型暗箱式紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂),定量点样毛细管,国产薄层预制G板(青岛海洋化工厂分厂),国产薄层预制GF254板(青岛海洋化工厂分厂)。
  1.2 试药
  板蓝根药材、甘草药材、地胆草药材均由广东药学院药用植物学教研室李书渊教授鉴定;靛玉红对照品(中国药品生物制品检定所, 7179402);甘草次酸对照品(中国药品生物制品检定所,723200109);清喉消炎颗粒(规格为10 g/袋,批号为20060601,20060602,200606030)、板蓝根阴性对照样品、地胆草阴性对照样品、甘草阴性对照样品均由广州医学院第二附属医院提供,其余试剂均为分析纯。
  2、实验部分
  2.1 板蓝根的薄层鉴别
  取本品颗粒50 g,加入硫酸钠饱和的水溶液80 mL溶解,转移至分液漏斗中,用乙醚振摇提取3次,每次30 mL,合并乙醚液,用质量分数为1%的氢氧化钠溶液洗涤3次,每次30 mL,再用水洗涤3次,每次30 mL,取乙醚液,水浴上蒸干,残渣加二氯甲烷约0.5 mL使其溶解,作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材6 g,加无水乙醇适量,加热回流1 h,滤过,滤液于水浴上蒸干,残渣加入硫酸钠饱和的水溶液20 mL溶解,同法制成对照药材溶液。取板蓝根的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。另取靛玉红0.3 mg加2 mL二氯甲烷溶解,作为对照品溶液。
  吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各10 μL,对照品溶液2 μL,分别点于同一以0.3%羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯二氯甲烷丙酮(体积比5∶4∶1)为展开剂,展开,展距约为7.3 cm。取出,晾干,日光下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的红色斑点,而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图1。
  2.2 地胆草的薄层鉴别
  称取本品颗粒30 g,加水60 mL溶解,用三氯甲烷萃取3次,每次30 mL,合并三氯甲烷液,水浴上蒸干,残渣加无水乙醇2 mL使其溶解,作为供试品溶液。另取地胆草药材4 g,加体积分数60%乙醇60 mL,水浴上加热回流1 h,滤过,滤液除去乙醇后,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次30 mL,合并乙酸乙酯液,用适量无水硫酸钠脱水后,过滤,水浴上蒸干,残渣加无水乙醇2 mL使其溶解,作为对照药材溶液。再取地胆草的阴性样品,同供试品溶液方法制成阴性对照溶液。
  吸取上述3种溶液各2 μL,分别点于同一以0.3%羧甲基纤维素纳为黏合剂的硅胶G薄层板(厚500 μm)上,以环己烷丙酮乙酸乙酯(体积比5∶3∶1)为展开剂,展开,展距约为7 cm。取出,晾干,在紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的蓝色斑点,而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图2。
  2.3 甘草的薄层鉴别
  称取本品颗粒20 g,加入硫酸体积分数45%乙醇溶液(取硫酸7 mL,加体积分数45%乙醇稀释至100 mL即得)约60 mL,加热回流1 h。放冷,滤过,滤液用石油醚(60~90 ℃)萃取2次,每次50 mL,合并石油醚液,水浴上蒸干,残渣加无水乙醇1 mL使其溶解,作为供试品溶液[1]。取甘草对照药材2 g、甘草的阴性样品10 g,同法制成甘草对照药材溶液和甘草阴性样品溶液。另取甘草次酸对照品适量,加入无水乙醇溶解,配成质量浓度为1 mg/mL的对照品溶液。
  吸取供试品溶液溶液、阴性对照溶液各5 μL,对照药材溶液3 μL,甘草次酸对照品溶液1 μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60 ℃)甲苯乙酸乙酯冰醋酸(体积比10∶20∶10∶0.5)为展开剂,展开,展距约为7 cm。取出,晾干,在紫外光灯(254 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,而阴性对照色谱在相应的位置上无斑点。见图3。
  3、讨 论
  3.1 在中国药典中,板蓝根的薄层鉴别是以精氨酸作对照品,结果发现,供试品色谱中找不到精氨酸鉴别斑点。通过条件摸索,可以采用板蓝根另一成分靛玉红进行鉴别[2],结果斑点清晰,阴性不干扰。
  3.2 甘草的薄层鉴别,通常采用甘草酸铵作为对照品,结果发现,阴性样品在甘草酸铵对照品色谱相应位置有干扰,经反复摸索,也不能排除干扰;对样品进行水解,结果发现供试品色谱中,甘草次酸鉴别斑点明显,分离度好,阴性无干扰。
  3.3 薄层鉴别的条件耐用性实验中,板蓝根、甘草的薄层鉴定在湿度RH20%和RH75%以及在冰箱(4~10 ℃)中,鉴别斑点的位置无多大变化。因此湿度、温度变化基本不影响板蓝根、甘草的薄层鉴别。地胆草的薄层鉴定在湿度RH20%和RH75%展开所得到的鉴别斑点的Rf值无多大变化,但在冰箱(4~10 ℃)中得到的鉴别斑点的Rf值略有升高,可见温度对其Rf值有一定影响。
  【参考文献】
  [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:2005年版一部[S]:北京:化学工业出版社,2005:520.
  [2] 陈仁寿.国家药典中药实用手册[M].江苏:江苏科学技术出版社,2004:98-102.

药学专业毕业论文

03
  HPLC法测定异烟肼注射液含量
  【摘要】 目的 建立用HPLC法测定异烟肼注射液含量的方法。方法 HPLC法,采用Hypersil BDS C18柱,以乙腈0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(体积比5∶95)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长262 nm。结果 异烟肼在9.90~99.00 μg·mL-1浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率100.3%(RSD=1.0%)。结论 本法操作简便,快速准确,重复性好,可作为本品质量控制方法。
  【关键词】 HPLC法;异烟肼注射液;异烟肼
  异烟肼注射液为抗结核药,卫生部药品标准采用溴酸钾滴定法测定异烟肼含量[1]。本文参照文献[2]建立了HPLC法测定异烟肼注射液的含量,试验结果表明,本法操作简便,快速准确,重复性好,可用于异烟肼注射液含量测定。
  1、仪器与试药
  1.1仪器Agilent 1100液相色谱仪(安捷伦公司),Hypersil BDS C18柱(菲罗门公司),TU1901型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),AG285电子天平(梅特勒-托利多公司)。
  1.2试药异烟肼对照品(质量分数99.4%,批号T2006236,广州白云山明兴制药有限公司提供)。异烟肼注射液(批号061101,061102,061103;规格2 mL∶100 mg,广州白云山明兴制药有限公司生产)。乙腈(色谱纯,德国默克公司),磷酸二氢钠(分析纯),水(注射用水,广州白云山明兴制药有限公司自制)。
  2、方法与结果
  2.1对照品溶液的制备取异烟肼对照品约100 mg,精密称定,置100 mL量瓶中,加水使溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液(0.990 0 mg·mL-1);精密量取2 mL,置50 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,得质量浓度为0.039 60 mg·mL-1的对照品溶液。
  2.2供试品溶液的制备精密量取异烟肼注射液2 mL(约相当于异烟肼100 mg),置100 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取2 mL,置50 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
  2.3空白对照溶液的制备除异烟肼外,按处方采用“2.2”项下的方法制备空白对照溶液。
  2.4色谱条件与系统适用性试验色谱柱为Hypersil BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(体积比5∶95),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为262 nm,柱温为30 ℃,进样量为20 μL。分别将对照品溶液、供试品溶液与空白对照溶液注入液相色谱仪,记录色谱图。理论板数以异烟肼峰计算应不低于6 000。空白对照溶液在异烟肼峰处无干扰。结果见图1。
  图1对照品(A)、样品(B)及空白对照(C)高效液相色谱图(1.异烟肼) 略
  2.5 线性关系考察分别精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL对照品贮备液,置50 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定,记录色谱图,以峰面积(A)为纵坐标、质量浓度(ρ)为横坐标计算得回归方程:A=32.697ρ-14.975,r=0.999 9。结果表明,异烟肼在9.90~99.00 μg·mL-1范围内线性关系良好。
  2.6精密度试验取对照品溶液,连续重复进样5次,结果峰面积的RSD为0.04%,表明方法精密度良好。
  2.7重复性试验取同一批号异烟肼注射液(061101)5份,依法测定,计算,结果异烟肼含量的RSD为0.4%,表明方法重复性较好。
  2.8稳定性试验取供试品溶液于0、3、6、12、24、48 h分别依法测定,记录色谱图,结果峰面积的RSD为0.6%,表明供试品溶液在48 h内稳定。
  2.9回收率试验精密量取已知含量为1.023 mg·mL-1的异烟肼注射液(批号061101)1.0 mL,置50 mL量瓶中,分别精密加入对照品贮备液(0.9900 mg·mL-1)0.8、1.0、1.2 mL,加水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液,依法测定。结果见表1。
  表1异烟肼回收率试验结果 略
  2.10样品测定
  取本品,按“2.2”项下的方法制备供试品溶液,依法测定,记录色谱图,按外标法计算异烟肼含量。同时采用溴酸钾法测定含量。结果见表2。
  表2样品测定结果 略
  3、讨 论
  3.1测定波长的选择照紫外可见分光光度法,取对照品溶液在200~400 nm的波长范围内扫描,绘制吸收光谱图,测得异烟肼的最大吸收波长为262 nm;另取空白对照溶液在此范围内扫描,发现在异烟肼最大吸收峰处无干扰,故选择262 nm为检测波长。
  3.2流动相的选择曾选用不同比例的甲醇0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液、乙腈0.025 mol·L-1磷酸二氢钠溶液、乙腈0.075 mol·L-1磷酸二氢钠溶液为流动相进行试验,发现以乙腈0.075mol·L-1磷酸二氢钠溶液(体积比5∶95)为流动相的测定结果比较理想,故确定以此为流动相。
  3.3本法与现有药品标准方法的比较经试验,本文方法与溴酸钾法[1]测定异烟肼注射液的含量结果无显着差异,且本法灵敏度高,专属性强,快速准确,重复性好,可用于异烟肼注射液含量测定。
  【参考文献】
  [1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准:化学药品及制剂第一册[D].1989:41.
  [2] 杜兴.高效液相色谱法测定复方异烟肼片中各组分的含量[J].中国药事,15(2):116.

药学本科毕业论文范文

04
  含中药龙血竭的血清处理方法研究
  【摘要】 目的 研究含中药龙血竭的血清处理方法。方法采用适宜蛋白沉淀剂并以有机溶剂提取处理含中药龙血竭的血清样品,测定含药血清的HPLC图谱,以龙血竭溶液中5个特征成分的峰面积为对照计算提取率,确定制备含药血清的最佳方法。结果通过乙腈沉淀蛋白,采用乙酸乙酯进行提取,可使含药血清中龙血竭特征成分的提取率达到80%以上。结论本法可作为龙血竭含药血清的制备方法。
  【关键词】 龙血竭;含药血清;蛋白沉淀
  龙血竭为传统中药,是龙舌兰科植物剑叶龙血树[Dracaena cochinchinensis(Lour)S.C.Chen]含树脂木材的乙醇提取物[1]。龙血竭总黄酮(sanguis draconis flavones,SDF)是从龙血竭中提取得到的主要成分[2],包括黄酮、二氢黄酮、黄烷、查耳酮、二氢查耳酮等20多种化合物[3]。动物实验表明,龙血竭总黄酮能对抗整体动物心肌缺血损伤[2]。本实验将龙血竭HPLC图谱中特征峰较明显的5个成分的峰面积作为检测指标(其中2个主要成分为龙血素A和龙血素B),以龙血竭原溶液为对照计算体外加样后提取百分率,进行血清处理方法的研究。
  1、仪器与试剂
  Waters高效液相色谱仪:515 HPLC泵,2487双波长吸收监测器,N2000双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所);TDL802B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);超声仪(上海超声波仪器厂);TU1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);ZH2 BLENDER涡旋混合器(天津药典标准仪器厂)。
  广西产龙血竭(广西中医学院制药厂提供);龙血素A、龙血素B对照品(中国药品生物制品检定所提供);乙腈(色谱纯);甲醇,乙酸乙酯,丙酮,正丁醇,乙醚,三氯甲烷,正戊醇,95%乙醇,无水乙醇,三氯醋酸,均为分析纯;新西兰大耳白兔(广东省医学实验动物中心提供)。
  2、HPLC法的建立
  2.1色谱条件
  色谱柱:Diamonsil C18(5 μm,250 mm×4.6 mm);保护柱:Easyguard C18 Replacement Cartridges Cat#6101;流动相:乙腈1%冰醋酸(体积比38∶62);检测波长:280 nm;流速:1.2 mL/min。
  2.2溶液的制备
  取龙血素A、龙血素B对照品适量,用甲醇分别配制成每1 mL含10 μg的溶液,作为对照品溶液。
  取广西龙血竭,用甲醇配制成每1 mL含2 mg的溶液,0.45 μm微孔滤膜滤过,续滤液作为供试品溶液。
  2.3线性范围
  将龙血素A对照品溶液分别配制成浓度为0.925、4.625、9.250、13.875、18.500、23.125 μg/mL的溶液,进样10 μL,记录色谱图,进样量(m)与峰面积(A)的回归方程为:A=45 064 451m-10 379 768,r=0.999 2,线性范围为9.25~231.25 ng。
  同上,将龙血素B对照品溶液分别配制成浓度为0.947、4.735、9.470、14.205、18.940、23.675 μg/mL的溶液,进样10 μL,记录色谱图,进样量(m)与峰面积(A)的回归方程为:A=33 227 615m-10 135 858,r=0.999 0,线性范围为9.47~236.75 ng。
  2.4稳定性试验
  取“2.2”项下的供试品溶液分别于0、2、4、6、8、24 h进行检测,分别记录5个特征性成分的峰面积,相应峰面积的RSD值分别为1.83%、3.09%、2.89%、2.47%、2.05%,即供试品溶液在24 h内保持稳定。
  2.5供试品溶液HPLC图谱
  取“2.2”项下的供试品溶液,龙血素A、龙血素B对照品溶液及空白血清样品,各进样10 μL,记录HPLC图谱,见图1。
  图1供试品溶液(A)、龙血素A对照品(B)、龙血素B对照品(C)及空白血(D)HPLC图谱 略
  含中药龙血竭的血清处理方法研究在供试品溶液图谱上选取5个特征峰较明显的成分作为检测指标,保留时间分别为10.232、15.498、26.665、35.732、38.732 min,其中峰4和峰5经验证,确定为龙血素A(4′羟基2,4二甲氧基二氢查耳酮)和龙血素B(4′羟基2,4,6三甲氧基二氢查耳酮)[4],峰1、2和3结构未知。由上图可知,空白血清样品无干扰。
  3、结果与讨论
  3.1提取率的计算
  特征性成分的提取率=血清样品中特征性成分的峰面积/供试品溶液相应成分的峰面积×100%
  3.2血浆样品的处理方法
  3.2.1蛋白沉淀剂的选择
  实验中发现,供试品溶液与10%三氯醋酸会发生反应,出现混浊现象,故使用常用的蛋白沉淀剂甲醇、乙腈、无水乙醇、丙酮进行处理。
  由兔耳缘静脉取血约2 mL,置离心管中,加入供试品溶液1 mL,涡旋混合,分别加入各种蛋白沉淀剂甲醇、乙腈、无水乙醇和丙酮适量,离心,取上清液,水浴挥干后精密加入1 mL甲醇,超声溶解,0.2 μm微孔滤膜滤过,取续滤液10 μL进行HPLC检测。以供试品溶液5个指标性成分的峰面积为对照,计算得各成分的提取率见表1。
  表1不同蛋白沉淀剂制备含药血清的特征峰的提取率 略
  从表1可见,以甲醇作蛋白沉淀剂对5个特征峰的提取率均较低,丙酮次之,乙腈和无水乙醇相对高一些,但对峰3的提取率均低于50%,证明4种处理过程均无法避免血浆蛋白对药物的吸附,无法达到理想的提取效果。
  按上述实验步骤,在分别加入蛋白沉淀剂后,加入与血样同等量的乙酸乙酯,提取3次,涡旋混合,离心,取乙酸乙酯层,合并提取液,水浴挥干,精密加入1 mL甲醇,超声溶解,经0.2 μm微孔滤膜滤过,取续滤液10 μL进行HPLC检测。以供试品溶液5个指标性成分的峰面积为对照,计算得各成分的提取率见表2。
  从表2可见,含药血清在使用不同蛋白沉淀剂后,通过同种有机溶媒——乙酸乙酯进行提取,可不同程度提高5个特征性成分的提取率,以无水乙醇组提高效果最不明显,甲醇、乙腈、丙酮组均有显着提高,且乙腈组对5个特征峰的提取率均达到80%以上。
  表2不同蛋白沉淀剂与溶媒结合提取制备含药血清的特征峰的提取率  略
  3.2.2提取次数的选择
  使用乙腈作为蛋白沉淀剂,加入与血样同等量的乙酸乙酯,分别按2、3、4次进行提取,水浴挥干后精密加入1 mL甲醇,超声溶解,0.2 μm微孔滤膜滤过,取续滤液10 μL进行HPLC检测。以供试品溶液5个指标性成分的峰面积为对照,计算得各成分的提取率见表3。
  表3不同提取次数制备含药血清的特征峰的提取率 略
  由表3结果可见,使用与血样同等量的乙酸乙酯提取3次(见图2)的效果明显优于提取2次,当提取次数为4次时,对各特征性成分的提取率影响则较小,再增加提取次数意义不大。
  3.2.3提取溶剂的选择
  使用乙腈作为蛋白沉淀剂,采用其他种类提取溶剂如正丁醇、乙醚、氯仿对血样进行处理。以供试品溶液5个指标性成分的峰面积为对照,计算各成分提取率见表4。
  图2含中药龙血竭血清HPLC图谱 略
  表4不同提取溶剂制备含药血清的特征峰的提取率 略
  正丁醇对于峰2、4、5的提取率达到80%以上,但对峰1和3的提取率均低于75%;而乙醚和氯仿对峰3的提取率均低于50%,不及使用乙酸乙酯为提取溶剂的效果。
  4、结 论
  将含中药龙血竭的血清先通过乙腈沉淀血浆蛋白,再使用与血样同等量的乙酸乙酯提取3次,可使龙血竭中5个特征性成分的提取率达到80%以上。本研究结果可为中药龙血竭的体内药动学研究提供依据。
  【参考文献】
  [1] 孙胜利,宓鹤鸣,姚庆芳,等.不同来源国产血竭的薄层色谱和紫外光谱鉴别[J].中草药,2002,33(11):1033-1034.
  [2] 方伟蓉,李运曼,邓嘉元.龙血竭总黄酮对动物心肌缺血的保护作用[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10(9):1020-1024.
  [3] 张庆云,朱辉.龙血竭研究进展[J].武警医学院学报,2004,13(1):69-71.
  [4] 周志宏,王锦尧.龙血竭的化学成分研究[J].中草药,2001,32:484-486.

中药学毕业论文范文

05
  广西白背叶植物叶的化学成分
  【摘要】 目的 研究广西白背叶植物(Mallotus apelta)叶中的化学成分。方法 利用反复硅胶柱层析的方法对广西白背叶植物叶中的化学成分进行分离和纯化,通过IR、MS、NMR等光谱技术和化学方法鉴定化合物的结构。结果 从广西白背叶中分离得到4个化合物,经鉴定为大黄酚(Ⅰ),烟酸 (Ⅱ),异东莨菪内酯(Ⅲ)和对甲氧基苯甲酸 (Ⅳ)。结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ均为首次从该植物中分得。
  【关键词】 白背叶;大黄酚;烟酸;异东莨菪内酯;对甲氧基苯甲酸;
  白背叶(Mallotus apelta)为大戟科(Emphorbiaceae)野桐属植物,又名白面戟、白桃树、白面风等[1]。味微苦涩,性平,其叶具有清热利湿、止痛解毒和止血的功效,可用于治疗口疮、跌打损伤、湿疹、外伤出血等,也可用于治疗慢性肝炎,对降低转氨酶和缩小肝脾有一定的作用,另外也可用于治疗水肿等疾病。1985年单雪琴等[2]报道在白背叶根的乙醇提取物中获得了高根二醇3醋酸酯、二羟基羽扇烷、β谷甾醇和乌索酸乙酸酯4个化合物。徐一新等[3]也对白背叶根化学成分进行了研究,从中得到了4个化合物:Acetyl aleuritolic acid、高根二醇3醋酸酯、东莨菪内酯、胡萝卜苷。程晓芳等[4]对其根的乙醇提取物进行研究,得到18个化合物:1个三萜酯类化合物、8个二萜类化合物、5个香豆素类化合物、1个没食子酸衍生物、1个生物碱、1个谷甾醇类和蔗糖。安天英等[5]从其叶乙醇提取物得到19个化合物:11个苯并吡喃类化合物,1个二肽类化合物,5个黄酮类化合物,以及对羟基苯甲醛和β谷甾醇。Phan Van Kiem等[6]从白背叶植物叶的甲醇提取物中分离得到7个五环三萜类化合物:3αHydroxyhop22(29)ene、hennadiol、friedelin(木栓酮)、friedelanol(木栓烷醇)、epifriedelanol(表木栓烷醇)、taraxerone(蒲公英赛酮)和epitaraxerol。
  为了进一步研究其药理活性的物质基础,本文对广西白背叶植物叶的化学成分进行了研究,从叶中首次分离得到4个化合物,分别为大黄酚(Ⅰ),烟酸 (Ⅱ),异东莨菪内酯(Ⅲ)和对甲氧基苯甲酸 (Ⅳ)。
  1、仪器与材料
  熔点用Kafler显微熔点测定仪测定(温度计未校正);红外光谱用EQUINOX55型红外光谱仪测定。质谱用ZABHS型双聚焦磁质谱仪;核磁共振用VarianINOVA500MHz超导核磁共振波谱仪;柱层析和薄层层析硅胶均由青岛海洋化工厂生产。显色剂为碘蒸气和5%磷钼酸乙醇溶液。所用试剂均为分析纯。药材于2004年7月采于广西金秀县,由广东药学院中药学院刘基柱老师鉴定为Mallotus apelta。
  2、提取与分离
  取干燥的广西白背叶10 kg粉碎,粗粉用热水煎煮3次 ,合并煎煮液,浓缩干燥得到2 kg浸膏,粉碎,用70%(体积分数)乙醇溶解滤除不溶物,滤液加2~3倍量水,水浴蒸至无醇味,依次用氯仿、乙酸乙酯萃取,得到氯仿部位和乙酸乙酯部位。
  将氯仿萃取物40 g 经硅胶(200目)柱层析,用石油醚乙酸乙酯梯度洗脱,TLC监测。其中,石油醚乙酸乙酯(50∶1)流份,用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅰ(20 mg);石油醚乙酸乙酯(10∶3)洗脱,甲醇重结晶得到化合物Ⅱ(30 mg);石油醚乙酸乙酯(4∶1)洗脱,用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅲ; 石油醚乙酸乙酯(10∶1)流份,用石油醚/乙酸乙酯重结晶得到化合物Ⅳ(20 mg)。
  3、结构鉴定
  化合物Ⅰ~Ⅳ的结构式如下:
  化合物Ⅰ:红色颗粒,mp197~199 ℃,Borntrager反应呈红色,醋酸镁反应呈橙红色,示为蒽醌类物质。紫外可见区有5个吸收峰:235、255、286、308、427,其峰位具有典型的羟基蒽醌类化合物的紫外特征吸收。IRKBr(cm-1): 1 606,1 568,1 476,1 453应为苯环及其相应的弯曲振动峰;2 924提示结构中也可能存在甲基;1 677应为游离羰基;1 628应为缔合羰基,证明具1,8二羟基。
  1HNMR(500 MHz,Acetone): δ 12.03(1H)和11.93(1H)处于低场,为苯环上的酚羟基;δ7.82(1H,d,J=8 Hz,H6),δ7.77(1H,dd,J=8 Hz,J=1 Hz,H5),δ7.62(1H,t,H4),δ7.35(1H,dd,J=8 Hz,1 Hz,H7), δ7.19(1H,q,H2),推断应为蒽醌母核上的phH;δ2.50(3H,s)应为与苯环相连的甲基,处于较低场,因此推测该甲基与羟基将为间位,而且H2和H4均呈现由于远程耦合所致的细微的多重裂分,也证实3位甲基的存在;有5个芳氢亦说明该化合物为三取代蒽醌。
  13CNMR (125 MHz Acetone):δ 192.8和182.1提示存在与苯环相连的羰基;δ 138.2,125.1,124.9,121.6,120.3 应为蒽醌母核上的CH;22.1应为与苯环相连的甲基。EIMS(m/z):254(100%),239,237,226,198,181,152,90,76等;分子离子峰254即基峰与蒽醌类化合物的质谱特点相符,主要碎片中有连续失去CO的226,198,以及失去OH(237),CH3(239)等取代基的碎片离子,以及由母核骨架208连续失去CO后(180,152)再裂解产生的双电荷离子碎片(90,76)。根据以上光谱分析和质谱数据推测化合物1应是1,8二羟基3甲基蒽醌,与文献[7]对照,发现其理化数据与大黄酚基本一致,鉴定为大黄酚。理化数据如下: 1HNMR(500 MHz,Actone):δ: 7.82(1H,q,J=8 Hz,H=7),7.77(1H,dd,J=8Hz, J=1Hz, H=6),7.62(1H,s,H4),7.35(1H,dd,J=8 Hz,J=1 Hz,H5),7.19(1H,s,H2),2.50(3H,s,H11)。13CNMR (125 MHz,Acetone)δ:163.1(C1),125.1(C2),135.0(C3),120.3(C4),132.1(C4a),124.9(C5),134.7(C5a),138.2(C6),150.9(C7),163.0(C8),120.1(C8a),192.8(C9),182.1(C10),22.1(C11)。
  化合物Ⅱ:白色针状晶体(甲醇), mp234~237 ℃, IRKBr(cm-1):1 712提示存在共轭羰基,观察不到芳环特征峰。  13CNMR 和DEPT谱可观察到4个CH以及2个季碳, δ166.2显示可能存在羧基;δ153.3,150.2,136.9,126.5,123.8提示存在与极性基团相连的烯烃基团。1HNMR(500 MHz)质子信号出现相互耦合高级裂分形成的多重峰,因此推断化合物应为环状,具有芳环特征; δ13.38的氢处于如此低场,应为羧基;δ7.54的氢与其他氢均有耦合,其中与δ8.27的氢耦合常数为8,与δ8.79的氢耦合常数为5,与δ9.07的氢耦合常数为1;δ8.79的氢与δ8.27的氢耦合常数为2,耦合常数如此小,且处于如此低场,与吡啶化合物的氢波谱行为形似,因此可能为以吡啶为母核的化合物。
  与文献[8]对照,发现与2位或3位羰基取代的吡啶的氢谱基本一致,氢归属依次为δ7.54(5H), δ8.27(4H), δ8.79(6H), δ9.07(2H),因此推定化合物Ⅱ为羧基取代的吡啶。与文献[8]的碳谱比较,2位取代吡啶的化合物杂环上季碳化学位移在130~140之间,约在135的位置,3位取代吡啶的化合物杂环上季碳化学位移在120~130之间,约在126的位置,与13CNMR中季碳126.5接近,因此鉴定为3位取代的吡啶化合物。综合碳谱和氢谱,推断分子式为C6H5O2。与文献[9]对照,鉴定化合物Ⅱ为烟酸。理化数据如下:1HNMR(DMSO,125 MHz)δ:7.54(5H),8.27(4H), 8.79(6H),9.07(2H)。13CNMR(DMSO,500 MHz)δ:166.2(—COOH),153.3(C2),150.2(C6),136.9(C4),126.5(C3),123.8(C5)。
  化合物Ⅲ:淡黄色针晶(EtoAc),mp205~206.4 ℃,FABMS给出分子量192,结合DEPT谱确定分子式为C10H8O4。硅胶薄层色谱在365 nm紫外灯下显蓝色荧光。 UVλmax(甲醇):204,224,292,340,显示有氧取代苯环和α吡酮环。IRKBr(cm-1):3 337,3 024,3 991,3 948,1 700,1 288,1 263,显示有酯基和苯环存在。1HNMR(Acetone)谱显示有一个甲氧基质子信号,δ3.91(3H,s),δ6.17(1H,d, J=9.6Hz)与δ7.83(1H,d, J=9.6Hz)有邻位偶合关系,为香豆素特征;δ6.79(1H,s)和δ7.19(1H,s)两者无明显偶合关系,说明为苯环对位H,提示该香豆素的6,7位有取代,根据分子式可知6,7位应为甲氧基及羟基取代。13CNMR (125 MHz,Acetone):δ160.3为香豆素内酯环的羰基;δ 150.2(C6),150.9(C7)与东莨菪内酯6,7位的碳化学位移值明显不同。综合以上数据,与文献[10]对照,鉴定为异东莨菪内酯。理化数据如下:1HNMR(500 MHz,DMSO)δ: 3.91(3H,s,C11), δ6.17(1H,d, J=9.6 Hz,H3), δ7.83(1H,d, J=9.6 Hz,H4), δ6.79(1H,s,H5), δ7.19(1H,s,H8)。13CNMR (125 MHz,Acetone)δ: 160.3(C2),112.4(C3), 143.7(C4)102.8(C5),150.2(C6),150.9(C7),109.1(C8),145.0(C9),111.2(C10)。
  化合物Ⅳ:淡黄色粉末(石油醚/乙酸已酯),mp165.7~168.7 ℃,易溶于甲醇,溴甲酚绿试剂显黄色。IRKBr(cm-1):3 500~2 000(br,羧基),2 200~2 000的泛频峰及1 576,1 603,提示存在苯环。DEPT谱及1HNMR提示分子中存在1个CH3,4个CH ,3个季碳和1个羧基,从而推断分子式为C8H8O3。13CNMR (氘代丙酮):δ 167.398吸收峰证实共扼羧基的存在,1个甲氧基信号是55.837。 1HNMR(氘代丙酮):δ3.886(3H,s)证明存在1个CH3;7.0(2H,d), 8.0(2H,d) 为AA′XX′自旋偶合系统,为对位取代的苯环质子信号。综合以上分析,与文献[11]对照鉴定为对甲氧基苯甲酸。理化数据如下:1HNMR(Acetone,500 MHz) δ: 3.89(3H,s,H1), 7.02(2H,d,J=8.8 Hz,H3), 7.99(2H,d,J=8.8 Hz,H4)。13CNMR(Acetone,125 MHz) δ: 55.8(C1), 164.3(C2), 114.5(C3), 132.4(C4), 123.8(C5), 167.4(C6) 。
  (本文波谱数据由中山大学分析测试中心测定,特此致谢!)
  【参考文献】
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药学毕业论文怎么写

06
  1、论文题目:要求准确、简练、醒目、新颖。
  2、目录:目录是论文中主要段落的简表。(短篇论文不必列目录)
  3、提要:是文章主要内容的摘录,要求短、精、完整。字数少可几十字,多不超过三百字为宜。
  4、关键词或主题词:关键词是从论文的题名、提要和正文中选取出来的,是对表述论文的中心内容有实质意义的词汇。关键词是用作机系统标引论文内容特征的词语,便于信息系统汇集,以供读者检索。 每篇论文一般选取3-8个词汇作为关键词,另起一行,排在“提要”的左下方。
  主题词是经过规范化的词,在确定主题词时,要对论文进行主题,依照标引和组配规则转换成主题词表中的规范词语。
  5、论文正文:
  (1)引言:引言又称前言、序言和导言,用在论文的开头。 引言一般要概括地写出作者意图,说明选题的目的和意义, 并指出论文写作的范围。引言要短小精悍、紧扣主题。
  〈2)论文正文:正文是论文的主体,正文应包括论点、论据、 论证过程和结论。主体部分包括以下内容:
  a.提出-论点;
  b.分析问题-论据和论证;
  c.解决问题-论证与步骤;
  d.结论。
  6、一篇论文的参考文献是将论文在和写作中可参考或引证的主要文献资料,列于论文的末尾。参考文献应另起一页,标注方式按《GB7714-87文后参考文献着录规则》进行。
  中文:标题--作者--出版物信息(版地、版者、版期):作者--标题--出版物信息所列参考文献的要求是:
  (1)所列参考文献应是正式出版物,以便读者考证。
  (2)所列举的参考文献要标明序号、着作或文章的标题、作者、出版物信息。